现有技术中，关于复方三维右旋泛酸钙糖浆中B族维生素质量控制方法已有报道或者已有标准，但是这些方法均仅能测定1-2种维生素的含量，或者需用针对每种维生素采用多种不同方法来分别检测，难以全面反映复方三维右旋泛酸钙的B族质量，无法实现多种维生素的同时测定。

二、 解决的技术问题

提供一种高效液相色谱法，可以实现以复方三维右旋泛酸钙糖浆及其中间体为背景的维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酰胺4种维生素同时测定的方法。

三、技术方案
一种检测复方三维右旋泛酸钙糖浆4种B族维生素的方法，以乙腈为流动相A相，以含十二烷基硫酸钠的甲酸水溶液为流动相B相；取待测溶液进行HPLC检测后，根据色谱图对维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酰胺4种维生素进行定性和/或定量分析。

四、技术效果

本发明检测方法可同时实现维生素B1、维生素B2、维生素B6和烟酰胺的检测，采用本发明方法检测，操作简单，测定结果准确可靠。本发明检测方法不仅具有较高的精密度，还具有良好的重现性。采用本发明的洗脱梯度，可将四种维生素完全分开，分离度高，分离效果好。检测过程中，无需使用三乙胺，更加安全。本发明方法应用前景广泛，可以为复方三维右旋泛酸钙糖浆的开发和质量检测提供可靠的实验依据。

五、审查意见指出

对比文件1（“高效液相色谱法测定保健食品中的5种水溶性维生素的研究”，华永有等，海峡预防医学杂志，第17卷第1期，第54-56页，2011年2月28日）公开了一种高效液相色谱法测定保健食品中5种水溶性维生素的方法，区别技术特征在于检测对象不同，流动相B相的选择不同。对于检测对象不同，审查员认为只是简单的技术转用，无需付出创造性劳动，而对于流动相B相的选择，对比文件2公开了采用“十二烷基磺酸钠”作为流动相同时检测维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酰胺4中维生素，审查员认为十二烷基硫酸钠和十二烷基磺酸钠化学性质相近，因此本领域技术人员在对比文件2的启示下，选择十二烷基硫酸钠作为流动相B是容易想到的。

六、答复审查意见

主要思路:摆事实讲道理，进而解释说明“以十二烷基硫酸钠作为高效液相色谱流动相B相的离子对试剂”是本发明的发明点所在，本发明具有创造性的关键点。通过代理人与发明人的沟通，了解到十二烷基硫酸钠和十二烷基磺酸钠两者在结构上存在差异，性质也完全不同，十二烷基硫酸钠多用于凝胶电泳和毛细管电泳，而现有技术中并没有将十二烷基硫酸钠用于作为高效液相色谱的流动相B相的先例；基于此，发明人还提供了中国知网的检索记录，以反向离子对和维生素作为检索词进行检索，共检索收集了32条文献，其中维生素类的反相离子对均在烷基季胺盐和烷基磺酸盐二类中优选，并未去考虑采用十二烷基硫酸钠；从而证明了选择十二烷基硫酸钠作为高效液相色谱检测维生素流动相B相并非常规技术手段。最后，审查员接受了申请人的上述答复观点，且没有检索到新的证据，直接授权。
 

从以上案例，我们不难发现，上述专利中的特定技术特征是以十二烷基硫酸钠作为高效液相色谱流动相B相的离子对试剂，这也是发明人能够解决技术问题的关键所在，是整个技术方案能够具有创造性逻辑的关键点。而发明人在提供技术交底时，往往忽略了这些关键点的解释说明，没有在交底书中体现突出本发明的实质性特点，而使得审查员低估了本发明的创造性，使申报的专利没有创造性而被驳回。专利审查指南第四章所定义的发明创造性的概念：发明的创造性是指与现有技术相比，该发明有突出的实质性特点和显著的进步。即判断发明的创造性，突出的实质性特点和显著的进步缺一不可。而发明人在撰写技术交底书时往往仅通过技术效果来体现其显著的进步，而往往忽略了在技术交底书中体现其突出的实质性特点。突出的实质性特点体现在技术方案相对于现有技术是非显而易见的，即本领域技术人员在现有技术的基础上如果仅仅通过合乎逻辑的分析、推理或有限的试验可以得到，就不具有突出的实质性特点。

例如上述专利中的“十二烷基硫酸钠”，与常用的“十二烷基磺酸钠”仅一字之差，却是结构性质完全不同的两种物质，使用十二烷基硫酸钠作为高效液相色谱的流动相B相的离子对试剂并非仅仅通过合乎逻辑的分析、推理或有限的试验可以得到，而是发明人根据自身扎实的专业基础、大胆地尝试和不断的试验而得到，是需要真正付出创造性劳动的。如果发明人在技术交底书中对使用十二烷基硫酸钠作为高效液相色谱的流动相B相的离子对试剂的非显而易见性进行着重阐述，则更有利于专利代理人对于专利权利要求的合理布局，也能够更快地得到审查员的认可，获得授权。